Question

【題目】下圖為利用人成纖維細胞(具分裂能力、能在 HAT 培養(yǎng)基上存活)和小鼠骨髓瘤細胞(具分裂能力、不能在 HAT 培養(yǎng)基上存活)進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關(guān)問題：

（1）圖示方法是____技術(shù)的應(yīng)用，該技術(shù)的基礎(chǔ)是____技術(shù)。

（2）操作所用的成纖維細胞應(yīng)傳代____代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時需要加入的化學(xué)促融劑是____。

（3）人、鼠細胞先經(jīng)過細胞融合形成________，再經(jīng)過一次____，形成單核細胞。

（4）HAT培養(yǎng)基起____培養(yǎng)作用，培養(yǎng)時溫度應(yīng)為____℃ ，操作中加入鳥本苷的目的是_____。

Answer 1

【答案】動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng) 10 PEG（或滅活病毒） 多核細胞 有絲分裂 選擇 36.5±0.5 除去成纖維細胞

【解析】

1、分析圖示：該技術(shù)屬于動物細胞融合。
2、動物細胞工程常用的技術(shù)手段有：動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等，其中動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物工程技術(shù)的基礎(chǔ)。原代培養(yǎng)細胞傳至10代左右就不容易傳下去，細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡。

3、動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞；誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒等。

（1）據(jù)圖分析，該技術(shù)屬于動物細胞融合技術(shù)；該技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。

（2）成纖維細胞應(yīng)傳代10代以內(nèi)；遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變的細胞株，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是PEG（或滅活病毒）。

（3）人、鼠細胞先經(jīng)過細胞膜融合形成多核細胞；經(jīng)過一次有絲分裂，形成單核細胞。

（4）據(jù)題干信息，人成纖維細胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用；培養(yǎng)時溫度應(yīng)為36.5±0.5℃；篩選出人成纖維細胞和成纖維細胞融合的雜交細胞，操作中加入鳥本苷的目的是除去成纖維細胞，篩選出雜交細胞。