Question

【題目】乳腺炎和口蹄疫分別是由細(xì)菌和病毒引起的危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的兩種嚴(yán)重疾病。研究者利用生物技術(shù)培育出轉(zhuǎn)乳鐵蛋白肽(抗細(xì)菌）和人干擾素(抗病毒）的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種。下圖1為基因表達(dá)載體，圖2為培育流程。

（1）培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有___________(至少2項(xiàng)）。

（2）牛乳鐵蛋白肽基因能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞表達(dá)，人干擾素基因則可在全身細(xì)胞表達(dá)，這與構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)_____________的選擇有關(guān)。據(jù)圖可知，干擾素基因與___________基因可同時(shí)轉(zhuǎn)錄，但在翻譯時(shí)，核糖體可識(shí)別mRNA上IRES序列的對(duì)應(yīng)部分，啟動(dòng)另一種肽鏈的合成，因此用含有新霉素的培養(yǎng)基可篩選出__________。

（3）將基因?qū)�入牛胎兒成纖維細(xì)胞前，需用______________將其處理成單個(gè)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞無法直接發(fā)育成個(gè)體，需要去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo)，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核的_______________。

（4）研究者利用___________技術(shù)篩選出___________(填“牛乳鐵蛋白基因”或“干擾素基因”)成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植。

Answer 1

【答案】基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、核移植、胚胎移植 啟動(dòng)子 新霉素抗性 干擾素基因成功表達(dá)的細(xì)胞 胰蛋白酶 全能性 抗原一抗體雜交 干擾素基因

【解析】

本題考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程，考查對(duì)基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程操作步驟的理解和識(shí)記。據(jù)圖2可知，培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)包括轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

（1）培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛需要通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，據(jù)圖可知，除轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，獲得雙轉(zhuǎn)基因奶牛還借助于核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。

（2）構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)啟動(dòng)子的位置可決定目的基因在何種細(xì)胞中表達(dá)。據(jù)圖可知，干擾素基因與新霉素抗性基因均位于相同的啟動(dòng)子和終止子之間，可同時(shí)轉(zhuǎn)錄，在翻譯時(shí)，核糖體可識(shí)別mRNA上IRES序列的對(duì)應(yīng)部分，啟動(dòng)另一種肽鏈的合成，使新霉素抗性基因得到表達(dá)，因此在含有新霉素的培養(yǎng)基可生存的細(xì)胞干擾素基因也已成功表達(dá)。

（3）對(duì)牛胎兒成纖維細(xì)胞用胰蛋白酶處理，可水解細(xì)胞間的膠原纖維，使細(xì)胞分散。將成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可誘導(dǎo)已分化的細(xì)胞核恢復(fù)分裂、分化，并最終發(fā)育為新個(gè)體，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞核的全能性。

（4）牛乳鐵蛋白基因在成年牛的乳腺中才能表達(dá)，人干擾素基因可在牛全身細(xì)胞表達(dá)，因此篩選胚胎時(shí)可利用抗原一抗體雜交技術(shù)篩選干擾素基因成功表達(dá)的胚胎。