Question

【題目】萌發(fā)的禾各類種子中主要有α-淀粉酶和β—淀粉酶，α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6、0℃下可迅速失活，而β—淀粉酶耐酸、不耐熱，在溫度為70℃條件下15min后失活，某實驗小組進行了“提取小麥種子中α-淀粉酶并測定α-淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度”的實驗。

實驗步驟：

步驟一：獲得含有α-淀粉酶和β—淀粉酶的酶溶液。

步驟二：獲得僅α-淀粉酶有活性而β-淀粉酶無活性的酶液。

步驟三：取12支干凈的、體積相同并具刻度的試管依次編號，按下表要求加入試劑，再觀察各試管內的色變化（注：“+”表示碘液變藍色，“—”表示碘液不變色）。

試管編號 步驟	1	2	3	4	5	6
①3%的可溶性淀粉溶液/mL	8	8	8	8	8	8
②保持恒定溫度（℃）5min	0	20	40	60	80	100
試管編號步驟	1＇	2＇	3＇	4＇	5＇	6＇
③α—淀粉酶有活性、β—淀粉酶無活性的酶液（mL）	1	1	1	1	1	1
④保持恒定溫度（℃）5min	0	20	40	60	80	100
⑤將②④步驟中相應試管溶液混合、震蕩后保持恒定溫度（℃）5min	0	20	40	60	80	100
⑥加入碘液，震蕩后觀察顏色變化	+++	++	+	-	++	+++

請回答下列問題：

（1）該實驗中的自變量是____________，因變量是________________。

（2）步驟二的具體操作方法是____________________。

（3）根據(jù)實驗結果可知，α—淀粉酶的最適溫度范圍是_______，若要測定該酶的最適溫度，下一步的具體做法是______________________________。

Answer 1

【答案】 溫度 α—淀粉酶的活性（試管的顏色變化或淀粉的水解速率等） 將步驟一制備的酶溶液置于70℃的水浴鍋中15分鐘，取出后迅速冷卻至室溫 40～80℃ 在40～80℃ 范圍內設置一系列溫差更小的溫度梯度，用同樣的方法比較不同溫度下該酶的活性

【解析】本題考查影響酶活性的相關實驗，意在考察考生對知識點的理解和應用能力。

（1）由題意可知該小組進行的是“提取小麥種子中α-淀粉酶并測定α-淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度”的實驗，所以自變量是溫度，因變量根據(jù)表格中觀察的是顏色變化，即α—淀粉酶的活性。

（2）步驟二要獲得僅α-淀粉酶有活性而β-淀粉酶無活性的酶液，根據(jù)題干中α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6、0℃下可迅速失活，而β—淀粉酶耐酸、不耐熱，在溫度為70℃條件下15min后失活，應將步驟一制備的酶溶液置于70℃的水浴鍋中15分鐘，取出后迅速冷卻至室溫，此時β-淀粉酶無活性。

（3）根據(jù)實驗結果無顏色的說明淀粉已經水解完，α—淀粉酶的最適溫度范圍是40～80℃。若要測定該酶的最適溫度，應在40～80℃ 范圍內設置一系列溫差更小的溫度梯度，用同樣的方法比較不同溫度下該酶的活性。