Question

【題目】真核生物基因中通常有內含子，原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內含子對應的RNA序列的機制。已知在人體中基因A（有內含子）可以表達出某種特定蛋白（簡稱蛋白A）�；卮鹣铝袉栴}：

（1）某同學從人的基因組文庫中獲得了基因A，__________________（能/不能）以大腸桿菌作為受體細胞表達出蛋白A。

（2）若用家蠶作為表達基因A的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用______________作為載體，原因是__________________。

（3）若要檢測基因A是否表達出蛋白A，可用的檢測物質是__________________（“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。

（4）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉化實驗為證明DNA是遺傳物質做出了重要貢獻，也可以說是基因工程的先導，如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是____________________________________。

（5）在利用PCR技術擴增基因A時，為實現(xiàn)序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記，反應體系中添加的原料應包括堿基已被標記的__________________（填“腺嘌呤核糖核苷酸”、“dATP”、或“ATP”）。PCR技術擴增目的基因的前提是要有__________________，以便據(jù)此合成引物，PCR技術中每輪循環(huán)依次包括__________________三個步驟，經(jīng)過30輪循環(huán)可迅速將基因A擴增數(shù)百萬倍。

Answer 1

【答案】不能 噬菌體 噬菌體的宿主是細菌，不是家蠶 蛋白A的抗體 DNA可從一種生物個體轉移到另一種生物個體 dATP 一段已知目的基因的核苷酸序列 變性、復性、延伸

【解析】

（1）將目的基因導入受體細胞常用的轉化方法：①將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。②將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是顯微注射技術，此方法的受體細胞多是受精卵。③將目的基因導入微生物細胞：原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。（2）目的基因的檢測與鑒定：①首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術；②其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交；③最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原-抗體雜交；④有時還需進行個體生物學水平的鑒定，如轉基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀（3）PCR技術擴增目的基因：①原理：DNA雙鏈復制②過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈（變性）；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈（復性）；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成（延伸）。③擴增目的基因的前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。

（1）真核生物的基因編碼區(qū)是不連續(xù)的，含有內含子和外顯子，內含子和外顯子都會轉錄產(chǎn)生相應的RNA，但內含子轉錄來的RNA被切除產(chǎn)生的RNA為mRNA，之后翻譯產(chǎn)生相應的蛋白質；原核生物的基因編碼區(qū)是連續(xù)的，不含有內含子和外顯子，編碼區(qū)直接轉錄產(chǎn)生相應的RNA，之后翻譯產(chǎn)生相應的蛋白質；因此從人的基因組文庫中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細胞卻未得到蛋白A，所以不能以大腸桿菌作為受體細胞表達出蛋白A。

（2）噬菌體是細菌病毒，專門寄生在細菌體內；家蠶是動物；因此家蠶作為表達基因A的載體，不選用噬菌體作為載體。

（3）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原-抗體雜交，所以若要檢測基因A是否表達出蛋白A，可用的檢測物質是蛋白A的抗體。

（4）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉化實驗為證明生物的遺傳物質是DNA，S型肺炎雙球菌的DNA可以轉移到R型菌中，并與R型菌中DNA重組。他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，這一啟示是DNA可從一種生物個體轉移到另一種生物個體。

（5）PCR技術的原料是dNTP，所以反應體系中添加的原料應包括堿基已被標記的dATP。PCR擴增目的基因的前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；PCR技術中每輪循環(huán)依次包括變性、復性、延伸三個步驟。