Question

7．土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤．T-DNA中含有植物生長素合成酶基因（S）和細胞分裂素合成酶基因（R），如圖1所示，它們的表達與否能影響相應植物激素的含量，進而調節(jié)腫瘤組織的生長與分化．基因工程常用Ti質粒作為運載體，圖2表示抗蟲棉培育中使用的三種限制酶A、B、C的識別序列以及Ti質粒上限制酶切割位點的分布，抗蟲基因內部不含切割位點，兩側標明序列為切割區(qū)域．

（1）據(jù)圖2分析，切取抗蟲基因時，使用酶B和酶C限制酶，切割Ti質粒時，使用酶A和酶B限制酶．
（2）成功建構的重組質粒含有限制酶A的識別位點0個，若用酶C處理該重組質粒，將得到2個DNA片段．
（3）若抗蟲基因插入的位置在R基因內部，篩選出生根瘤植株即是成功導入抗蟲基因的棉花植株．

Answer 1

分析 分析題圖：在目的基因的左側只有B酶的識別位點，右側只有C酶的識別位點；質粒上含有三種酶的識別位點，其中T-DNA上含有酶A和酶B的識別位點，因此應選用酶B和酶C切取目的基因，選用酶A和酶B切割Ti質粒．

解答 解：（1）在目的基因的左側只有B酶的識別位點，右側只有C酶的識別位點，因此應該使用酶B和酶C切取抗蟲基因，應該將目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位點，因此應該使用酶A和酶B切割Ti質粒．
（2）酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗蟲基因，使用酶A和酶B切割Ti質粒，再用DNA連接酶連接兩者形成重組質粒后，重組質粒不含酶A的識別位點，成功建構的重組質粒含有兩個酶C的識別位點，因此用酶C處理重組質粒將得到2個DNA片段．
（3）若抗蟲基因插入的位置在R基因內部，能誘發(fā)植物形成腫瘤，故篩選出生根瘤植株即是成功導入抗蟲基因的棉花植株．
故答案為：
（1）酶B和酶C     酶A和酶B   
（2）0    2 
（3）生根瘤

點評 本題結合圖解，考查基因工程的技術和原理，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，能根據(jù)圖中限制酶的識別序列及切割位點選擇合適的限制酶，再結合所學的知識準確判斷解答．