Question

【題目】依據(jù)復(fù)制與宿主菌相關(guān)程度不同，細(xì)菌中的質(zhì)粒分松散型質(zhì)粒和嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒。當(dāng)宿主菌蛋白質(zhì)合成停止時(shí)， 嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒 DNA 復(fù)制隨之停止，松散型質(zhì)粒 DNA 復(fù)制仍可進(jìn)行。

（1）通常選用松散型質(zhì)粒作為基因工程載體，原因是_____。

（2）細(xì)菌體內(nèi)限制酶不剪切該細(xì)菌本身的 DNA，這是在長(zhǎng)期的進(jìn)化中形成了一套完善的_____，但能 對(duì)外源 DNA 進(jìn)行降解，有利于_____。事實(shí)上，上述細(xì)菌仍允許部分異源 DNA 進(jìn)入體內(nèi)，其意義是_____。

（3）轉(zhuǎn)化是指_____。在培育轉(zhuǎn)基因熒光海馬時(shí)發(fā)現(xiàn)“轉(zhuǎn)化”不成功，原因可能是_____。

（4）人們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到，從微生物到人類都共用一套遺傳密碼，這一事實(shí)為研究基因工程提供了什么啟示：_____。

Answer 1

【答案】目的基因容易復(fù)制。 防御機(jī)制 防止外源DNA（遺傳物質(zhì)）的入侵 有利于生物變異和進(jìn)化 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并維持穩(wěn)定核表達(dá)的過程 目的基因未導(dǎo)入受體細(xì)胞；目的基因未轉(zhuǎn)錄；目的基因未翻譯（或未表達(dá)） 從蛋白質(zhì)的氨基酸組成，推測(cè)和合成目的基因；某生物的基因可以轉(zhuǎn)移到其他生物并表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）當(dāng)宿主菌蛋白質(zhì)合成停止時(shí)，嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒 DNA 復(fù)制隨之停止，松散型質(zhì)粒 DNA 復(fù)制仍可進(jìn)行，通常選用松散型質(zhì)粒作為基因工程載體，原因是目的基因容易復(fù)制。

（2）細(xì)菌體內(nèi)限制酶不剪切該細(xì)菌本身的 DNA，這是在長(zhǎng)期的進(jìn)化中形成了一套完善的防御機(jī)制，保護(hù)自身DNA不被破壞，能對(duì)外源DNA進(jìn)行降解，有利于防止外源DNA（遺傳物質(zhì)）的入侵。事實(shí)上，上述細(xì)菌仍允許部分異源 DNA 進(jìn)入體內(nèi)，其意義是有利于生物變異和進(jìn)化。

（3）轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并維持穩(wěn)定核表達(dá)的過程。在培育轉(zhuǎn)基因熒光海馬時(shí)發(fā)現(xiàn)“轉(zhuǎn)化”不成功，原因可能是目的基因未導(dǎo)入受體細(xì)胞；目的基因未轉(zhuǎn)錄；目的基因未翻譯（或未表達(dá)）。

（4）從微生物到人類都共用一套遺傳密碼，這一事實(shí)為研究基因工程提供的啟示：可以從蛋白質(zhì)的氨基酸組成，推測(cè)和合成目的基因；某生物的基因可以轉(zhuǎn)移到其他生物并表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)。