Question

【題目】下面是利用基因工程、胚胎工程等技術以牛為對象進行的研究工作，請分析回答問題：

（1）基因工程的基本操作流程中，當獲取目的基因后，在將其導入受體細胞前需要進行一個 重要的操作步驟，即構建______________，該步驟使用的兩種工具酶分別是______________。一個完整的基因表達載體中______________是RNA聚合酶識別、結合的部位。

（2）從公牛體內采集的精子需經(jīng)過______________處理，才能在體外與成熟卵細胞結合形成 受精卵。將目的基因導入受精卵中，受精卵在體外培養(yǎng)至早期胚胎，再移植到母牛子宮中。進行胚胎移植的優(yōu)勢是可以________________________________________________________。

（3）在早期胚胎時期取滋養(yǎng)層細胞通過______________方法進行DNA檢測，來判斷目的基因是否導入細胞中。外源基因是否合成相應的蛋白質，可從轉基因牛中提取蛋白質，并用相應的抗體進行“_____________”雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明牛體內的外源基因______________（填“已表達”或“未表達”）。

Answer 1

【答案】 基因表達載體 限制酶、DNA連接酶 啟動子 獲能 充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大縮短了供體本身的繁殖周期 DNA分子雜交 抗原一抗體 巳表達

【解析】試題分析：本題組要考查了基因工程的原理和技術、胚胎移植等技術，通過分析基因工程技術的基本步驟及胚胎移植優(yōu)點，再結合題中問題進行解答。

（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達，其中基因表達載體的構建是基因工程中最核心的步驟，構建基因表達載體的步驟中，首先需要限制酶切割外源DNA分子和運載體，其次還需要DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中啟動子是RNA聚合酶識別、結合的部位。

（2）進行體外受精前，需要對獲得的精子進行獲能處理，使精子具有受精的能力；進行胚胎移植的優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大縮短了供體本身的繁殖周期。

（3）檢測外源基因是否導入受體細胞用DNA分子雜交技術；檢測是否成功表達蛋白質采用抗原-抗體雜交技術，即從轉基因小鼠中提取蛋白質，并用相應的（單克�。┛贵w與提取的蛋白質者進行雜交，若能雜交，則表明小鼠體內的外源基因已表達。