Question

【題目】科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖所示：

（1）研究人員在過(guò)程①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增人凝血因子IX基因時(shí)，除了酶、引物、模板以外，還需要加入____________作為合成DNA的原料；PCR過(guò)程中需要不斷調(diào)整反應(yīng)體系的溫度，一般情況下，至少需要______個(gè)不同的反應(yīng)溫度。

（2）通過(guò)步驟②獲得的A，除了人凝血因子IX基因外，還含有_______________________（至少三個(gè)）等結(jié)構(gòu)。

（3）過(guò)程④指_______________，重組胚胎可以與普通代孕母羊的子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但是出生后的轉(zhuǎn)基因綿羊依然具有生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白的能力，原因是___________________________________。

（4）理論上，可以通過(guò)少量整合有目的基因的成纖維細(xì)胞，克隆出大量轉(zhuǎn)基因綿羊，請(qǐng)對(duì)這一問(wèn)題做出兩個(gè)合理的解釋： ___________________；____________________。

Answer 1

【答案】 dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs） 3 啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因 胚胎移植 移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過(guò)程中不受任何影響 整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可以進(jìn)行傳代培養(yǎng) 轉(zhuǎn)基因綿羊的體細(xì)胞可以作為供體細(xì)胞，克隆更多轉(zhuǎn)基因綿羊

【解析】試題分析：本題綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程的知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問(wèn)題情境，從題意和題圖中提取有效信息并與胚胎工程、核移植等知識(shí)建立聯(lián)系，進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增人凝血因子IX基因時(shí)，除了酶、引物、模板以外，還需要加入dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs）。PCR過(guò)程中需要不斷調(diào)整反應(yīng)體系的溫度，一般情況下，至少需要3個(gè)不同的反應(yīng)溫度，即溫度上升到90℃至95℃時(shí)雙鏈DNA解聚為單鏈，溫度降到55℃至60℃時(shí)兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條DNA單鏈結(jié)合，溫度上升到70℃至75℃時(shí)進(jìn)行子鏈的延伸。

(2)通過(guò)步驟②獲得的A為基因表達(dá)載體，該基因表達(dá)載體除了人凝血因子IX基因（目的基因）外，還含有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因。

(3)過(guò)程④指胚胎移植。由于移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過(guò)程中不受任何影響，所以出生后的轉(zhuǎn)基因綿羊依然具有生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白的能力。

(4)因整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，加之轉(zhuǎn)基因綿羊的體細(xì)胞可以作為供體細(xì)胞，克隆更多轉(zhuǎn)基因綿羊，所以理論上，可以通過(guò)少量整合有目的基因的成纖維細(xì)胞，克隆出大量轉(zhuǎn)基因綿羊。