Question

2．如圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其組成除了目的基因外還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因．
（2）在利用構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，常需使用限制酶和DNA連接酶．
（3）過(guò)程②采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，檢測(cè)抗蟲(chóng)基因是否整合到棉花細(xì)胞DNA分子上可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（4）獲得目的基因過(guò)程中，常用的方法有兩種途徑：一是以抗蟲(chóng)基因的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因．另一種方法是利用PCR擴(kuò)展DNA，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有引物、Taq酶、4種脫氧核苷酸、模板DNA．?dāng)U增過(guò)程可以再PCR擴(kuò)增儀中進(jìn)行．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程，其中①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程，③是脫分化過(guò)程，④是再分化過(guò)程．

解答 解：（1）過(guò)程①是將目的基因和質(zhì)粒重組成重組質(zhì)粒的過(guò)程，即基因表達(dá)載體的構(gòu)建；基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因等．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同一種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，使它們露出相同的末端，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組DNA．
（3）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（4）獲得目的基因過(guò)程中，常用的方法有兩種途徑：一是以抗蟲(chóng)基因的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因．另一種方法是利用PCR擴(kuò)展DNA，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有引物、Taq酶、4種脫氧核苷酸、模板DNA．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建      啟動(dòng)子      終止子
（2）限制性核酸內(nèi)切酶       DNA連接酶
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法       DNA分子雜交技術(shù)
（4）逆轉(zhuǎn)錄酶      DNA聚合酶      引物     Taq酶

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．