Question

【題目】民間傳統酒曲中含有大量的微生物，現進行下述實驗分離酒曲中的主要微生物。

（實驗一）將酒曲制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上，經培養(yǎng)后根據每個平板的菌落特征，統計不同微生物的菌落數，發(fā)現酒曲中主要有兩類微生物，即酵母菌和霉菌。

（1）上述操作過程中的接種方法是______________。

（2）根據菌落特征鑒別微生物時，能夠觀察的菌落特征有_____________（多選）。

A．形狀 B．顏色 C．表面 D．大小

在液體中，酵母菌比霉菌生長快；而酸性培養(yǎng)基中酵母菌比細菌生長更適宜。下述方案將酵母菌從酒曲中進行了分離。

（實驗二）用小刀切開曲塊，挖取米粒大小一塊投入酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中，然后置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩天。

（1）酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液的成分包括黃豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物質主要是__________。

（2）上述實驗操作中，需要滅菌的有_________（多選）。

A．酒曲 B．小刀 C．培養(yǎng)液 D．培養(yǎng)箱

（3）培養(yǎng)兩天后，可見培養(yǎng)液變渾濁，這是因為____________________________。

（實驗三）取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復多次。多次轉接后，取稀釋液用圖所示方法接種在蔗糖豆芽汁平板上。

（1）與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基中少了乳酸，多了瓊脂。這種成分改變的原因是：_____________________________________________________

（2）關于圖所示的接種方法的敘述，正確的是_____________（多選）。

A．酒精燈提供了局部無菌環(huán)境 B．接種環(huán)正在酒精燈火焰上灼燒滅菌

C．接種后的平板需倒置培養(yǎng) D．該接種方法能得到單個菌落

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 ABCD 蔗糖、乳酸（或蔗糖、乳酸、黃豆芽） BC 微生物進行繁殖，數量增加 利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進行，因此需加瓊脂 ACD

【解析】

微生物的營養(yǎng)物質主要包括碳源、氮源、水和無機鹽等；分離和純化微生物的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法。

實驗一 （1）由題干信息“分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上”可知，上述操作過程中的接種方法是稀釋涂布平板法。

（2）鑒定菌種時，作為觀察的菌落特征有性狀、顏色、大小、表面是否光滑等，故選ABCD。

實驗二 （1）黃豆芽、蔗糖、乳酸都可以為微生物提供碳源。

（2）酒曲內含有菌種，不能滅菌，A錯誤；小刀、培養(yǎng)液都需要嚴格滅菌，BC正確；培養(yǎng)箱需要消毒，D錯誤；因此，本題答案選BC。

（3）培養(yǎng)兩天后，由于微生物繁殖，數量增加，導致培養(yǎng)液變渾濁。

實驗三（1）利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進行，因此需加瓊脂。

（2）接種在酒精燈附近進行，提供了局部無菌環(huán)境，A正確；圖中接種環(huán)正在劃線，B錯誤；接種后的平板需倒置培養(yǎng)，C正確；圖示接種方法為平板劃線法，最終可以得到單個菌落，D正確；因此，本題答案選ACD。