苦馬豆素(SW)最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得,為了研究SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用,許多學(xué)者做了大量研究,實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
①取小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞.
②制成單細(xì)胞懸液,等量接種于多孔板,加入等量培養(yǎng)液,每組設(shè)5個(gè)平行孔.
③于37℃、5%CO
2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h.
④加入等量不同濃度的SW溶液,于37℃、5%CO
2培養(yǎng)箱中培養(yǎng).
⑤分別在24h、48h、72h時(shí)吸取培養(yǎng)液,觀察記錄結(jié)果,得到不同濃度的SW對(duì)細(xì)胞存活率的影響曲線如圖所示.
⑥將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心,細(xì)胞染色,在熒光顯微鏡下觀察拍照,記錄正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞的數(shù)目,并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量狀況,匯總統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表.
培養(yǎng)48h后細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)狀況
SW(μg/ml) |
癌細(xì)胞數(shù)目 |
凋亡細(xì)胞數(shù)目 |
Bax蛋白 |
Bcl-2蛋白 |
2 |
+ |
++++ |
++++ |
+ |
1 |
++ |
+++ |
+++ |
++ |
0.5 |
+++ |
++ |
++ |
+++ |
0 |
++++ |
+ |
+ |
++++ |
注:“+”的數(shù)量表示相對(duì)值的大小
回答下列問題:
(1)實(shí)驗(yàn)中首先將小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,于37℃、5%CO
2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是
.培養(yǎng)箱中要有適量的無菌空氣,原因是
.肝癌細(xì)胞懸液中細(xì)胞有懸浮生長(zhǎng)的特征,可能的原因是
.
(2)實(shí)驗(yàn)中利用多孔板培養(yǎng)時(shí),每組設(shè)置5個(gè)平行孔同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng),計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值是為了
.
(3)分析圖中曲線可知,SW對(duì)肝癌Hepal-6細(xì)胞的作用效果是:①
;②
.
(4)表中結(jié)果說明SW可以誘發(fā)細(xì)胞
,從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),從分子水平上分析,SW可能是導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi)
的合成量增加.