Question

2．中國苦蕎富含黃酮類化合物等營養(yǎng)物質，在降血糖、降血脂等方面功效顯著．查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關鍵酶，如圖為將修飾后的CHS基因導入苦蕎，培育高產黃酮苦蕎品系示意圖．

（1）要對培養(yǎng)基徹底滅菌應采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落，目的是判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底．
（2）接種前，外植體用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液進行消毒后都需經無菌水清洗．接種后2-5天，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是外植體消毒不徹底．
（3）過程②叫做脫分化，通過②和③過程能成功地把離體的苦蕎體細胞能培育成植株，此技術所利用的原理是植物細胞的全能性．
（4）判斷轉基因苦蕎培育是否成功，可比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量，也可通過凝膠色譜法分離測定細胞中CHS含量，由于CHS相對分子量大，所以最先從色譜柱中洗脫出來，工業(yè)化生產中，可利用固定化酶（固定化細胞）技術以提高CHS的利用率而節(jié)約成本．

Answer 1

分析 1、實驗室常用的消毒方法
煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒．
2、實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
3、植物組織培養(yǎng)技術包括脫分化和再分化兩個重要過程，而決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．

解答 解：（1）要對培養(yǎng)基徹底滅菌應采用高壓蒸汽滅菌．為了判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落．
（2）接種前，外植體用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液進行消毒后都需經無菌水清洗．接種后2-5天，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是外植體消毒不徹底．
（3）過程②叫做脫分化，過程③表示再分化，通過脫分化和再分化過程能成功地把離體的苦蕎體細胞能培育成植株，此技術所利用的原理是植物細胞的全能性．
（4）判斷轉基因苦蕎培育是否成功，可比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量，也可通過凝膠色譜法分離測定細胞中CHS含量，由于CHS相對分子量大，所以最先從色譜柱中洗脫出來，工業(yè)化生產中，可利用固定化酶（固定化細胞）技術以提高CHS的利用率而節(jié)約成本．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌   判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底
（2）70% 的酒精   外植體消毒不徹底
（3）脫分化    植物細胞的全能性
（4）相對分子量大    固定化酶（固定化細胞）

點評 本題綜合考查了微生物的分離與培養(yǎng)和植物細胞工程的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網絡的能力．