Question

【題目】牛奶中富含蛋白質(zhì)，長(zhǎng)期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)。生牛奶需要經(jīng)過(guò)消毒處理，達(dá)到國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方可飲用。以下是生牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為微生物主要提供______（填兩個(gè)），在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的過(guò)程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當(dāng)時(shí)間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表______時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋開(kāi)固定螺栓，開(kāi)蓋，才可以取出滅菌的培養(yǎng)基等物品。

（2）步驟②是______，若想對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可釆用的接種方法是______。

（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的______同時(shí)放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時(shí)。為避免培養(yǎng)基污染，需將培養(yǎng)皿呈______狀態(tài)放置。取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)，菌落數(shù)分別為 67、 65 和63，細(xì)菌數(shù)大約是______/mL。運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值______(填“偏大”或“偏小”)，原因是______。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、維生素等 壓力降為零（指針指向“0”點(diǎn)） 系列稀釋(或梯度稀釋) 稀釋涂布平板法 未接種的培養(yǎng)基 倒置 6.5ⅹ105個(gè) 偏小 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落重疊在一起時(shí)按一個(gè)菌落計(jì)算

【解析】

識(shí)圖分析可知，圖中①過(guò)程為巴氏消毒法，對(duì)牛奶在80℃進(jìn)行消毒15min；②過(guò)程為對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋的操作，根據(jù)圖中結(jié)果可知對(duì)菌液稀釋了1000倍，步驟③表示吸取0.1ml的菌液涂布在培養(yǎng)基上，采用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量。

（1）培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物的生長(zhǎng)提供碳源、氮源和維生素。常采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的過(guò)程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當(dāng)時(shí)間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表壓力降為零時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋開(kāi)固定螺栓，開(kāi)蓋，才可以取出滅菌的培養(yǎng)基等物品。

（2）圖中步驟②是系列稀釋(或梯度 稀釋)。若想對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可釆用步驟③所示的稀釋涂布平板法對(duì)目的菌進(jìn)行接種。

（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3小時(shí)在倒平板操作中，待平板冷卻疑固后將平板呈倒置狀態(tài)放置，可以使培養(yǎng)皿表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿 蓋上的水珠落入培養(yǎng)皿，對(duì)造成培養(yǎng)基污染。按圖示步驟②稀釋1000倍后接種，取岀后各平板的菌落數(shù)分別 為67、 65 和63，則細(xì)菌數(shù)大約是(67+65+63)÷3×10×1000= 6.5×105個(gè)/mL。運(yùn)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行的計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏低，因?yàn)閷?duì)菌落計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落重疊在一起時(shí)按一個(gè)菌落計(jì)算，導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。