Question

【題目】我國(guó)科學(xué)家研制成功具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的融合Bt殺蟲(chóng)基因，并將其導(dǎo)入棉花，創(chuàng)造出Bt轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉。請(qǐng)回答該技術(shù)中的有關(guān)問(wèn)題：

(l)基因工程是在____水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，常用的DNA連接酶有____。

(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是____，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR中需要的特殊酶為____。

(3)Bt毒蛋白基因必須插入棉花細(xì)胞的____，檢測(cè)Bt毒蛋白基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞的方法是________。

(4)要檢測(cè)抗蟲(chóng)棉是否成功，除了進(jìn)行分子檢測(cè)外，還需進(jìn)行____水平的鑒定，如做____實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】分子 E．coliDNA連接酶和T4DNA連接酶 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶） 染色體的DNA上 DNA分子雜交 個(gè)體 抗蟲(chóng)接種

【解析】

基因工程操作的工具是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體；基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。目的基因的檢測(cè)有多種手段，如①DNA分子雜交技術(shù)；②分子雜交技術(shù)；③抗原-抗體雜交技術(shù)。

（1）基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，故基因工程是在分子水平上進(jìn)行的，常用的DNA連接酶有從大腸桿菌分離出來(lái)的E．coliDNA連接酶和從T4噬菌體中分離出來(lái)的T4DNA連接酶。

（2）在PCR技術(shù)中擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR中需使用的特殊酶是熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（或Taq酶）。

（3）Bt毒蛋白基因必須插入棉花細(xì)胞的染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。檢測(cè)Bt毒蛋白基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞的方法是DNA分子雜交的方法。

（4）要檢測(cè)抗蟲(chóng)棉是否成功，除了進(jìn)行分子檢測(cè)外，還需進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定，在個(gè)體水平上檢測(cè)Bt基因在受體植株內(nèi)是否成功表達(dá)，可采用的方法是抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)。