Question

【題目】回答下列關于植物組織培養(yǎng)的問題。

（1）植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都會用到超凈臺，實驗前必須打開超凈臺的__________和__________，前者可以排出工作室原來的空氣，將塵埃粒和生物顆粒帶走。

（2）利用MS培養(yǎng)基配置發(fā)芽培養(yǎng)基時，除了加相應量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，還需要加入一定量的__________，以配置成固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配置后需經高壓蒸汽滅菌后備用，影響高壓蒸汽滅菌效果的因素有溫度、壓力、__________等因素。

（3）若使用自然生長的菊花莖段，進行菊花的組織培養(yǎng)，則可用__________和次氯酸鈉對莖段進行消毒；若莖段取自經__________培養(yǎng)的菊花幼苗，則不需要進行消毒，可直接插入生芽培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。發(fā)芽培養(yǎng)時__________（需要/不需要）光照條件。

Answer 1

【答案】過濾風 紫外燈 瓊脂 時間 70%乙醇 無菌 需要

【解析】

植物組織培養(yǎng)的注意事項：（1）接種時應注意的事項：接種室要消毒；無菌操作；接種時要防止交叉污染；接種完立刻蓋好瓶口。（2）外植體接種前，需要將接種室、接種箱滅菌和對外植體消毒的操作：接種前一天，將接種室的四個角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸；接種前1小時，在接種室內用噴霧器噴灑來蘇水；桌椅也用來蘇水擦拭；接種箱內用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。將滅菌室和接種箱內用紫外燈滅菌。接種前，操作者用肥皂清洗雙手，擦干，再用酒精棉球擦拭雙手。用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。

實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒、化學藥物消毒、紫外線消毒。實驗室常用的滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

（1）超凈臺的工作原理是：在特定的空間內，室內空氣通過特殊裝置過濾吹出的潔凈過濾風可以排出工作室原來的空氣，將塵埃顆粒和生物顆粒帶走，形成無菌的工作環(huán)境。在此操作過程中，同時需打開紫外燈，持續(xù)30分鐘以上。

（2）利用MS培養(yǎng)基配置成的發(fā)芽培養(yǎng)基應為固體培養(yǎng)基，因此除了加相應量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，還需要加一定量的凝固劑瓊脂，經高壓蒸汽滅菌后備用。高壓蒸汽滅菌一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。因此影響高壓蒸汽滅菌效果的因素有溫度、壓力、時間等因素。

（3）進行菊花的組織培養(yǎng)，需要對外植體進行消毒處理，用70%乙醇和5%次氯酸鈉對莖段進行消毒；若莖段取自經無菌培養(yǎng)的菊花幼苗，則不需進行消毒，可直接在無菌條件下插入生芽培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。發(fā)芽培養(yǎng)時需要在光照條件下培養(yǎng)，以利于葉綠素的合成。