Question

【題目】淀粉酶在食品加工及輕工業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛用途。研究人員從細(xì)菌中克隆了一種淀粉酶基因，為了獲得高產(chǎn)淀粉酶菌株，按下圖所示流程進(jìn)行基因工程操作。

（1）將淀粉酶基因與質(zhì)粒載體重組時(shí)需要使用的酶包括_________ 。

（2）大腸桿菌經(jīng)過_________ 處理后，可作為重組載體的宿主（感受態(tài)）細(xì)胞使用。

（3）為了初步篩選高產(chǎn)菌株，研究人員將得到的3個(gè)工程菌株接種到以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)后用稀碘液處理，可觀察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈。測(cè)量不同菌株形成的菌落及透明圈直徑，結(jié)果見下表。

工程菌	菌落直徑（C，mm）	透明圈直徑（H，mm）	H/C
菌株Ⅰ	8.1	13.0	1.6
菌株Ⅱ	5.1	11.2	2.2
菌株Ⅲ	9.5	17.1	1.8

①表中菌落直徑（C）的大小反映了__________，透明圈直徑（H）的大小反映了_____________。

②根據(jù)表中數(shù)據(jù)，可推斷其中淀粉酶產(chǎn)量最高的菌株是_______ 。

（4）基因工程技術(shù)已成功應(yīng)用于人類生產(chǎn)生活中的諸多方面。請(qǐng)從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實(shí)例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程。（限100字以內(nèi)）___________________

Answer 1

【答案】限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA 連接酶 Ca2+ / 氯化鈣 細(xì)菌的增殖速度 細(xì)菌分解淀粉的能力 菌株Ⅱ 示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細(xì)菌中克隆 Bt 蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細(xì)胞后進(jìn)行組織培養(yǎng)。經(jīng)對(duì)再生植株中目的基因的檢測(cè)，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。

示例二：基因工程胰島素。克隆人的胰島素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后， 檢測(cè)目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進(jìn)行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素。

【解析】

基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）→將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定

（1）將目的基因與質(zhì)粒載體重組時(shí)，需要使用同一種限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）將目的基因與質(zhì)粒切出相同的黏性末端，再用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒載體連接形成重組載體。

（2）大腸桿菌經(jīng)過Ca2+溶液（氯化鈣）處理后能成為感受態(tài)細(xì)胞。

（3）①菌落直徑越大，表明細(xì)菌數(shù)量越多，細(xì)菌增殖越快，因此菌落直徑的大小反映了細(xì)菌的增殖速度；淀粉被淀粉酶水解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈，因此透明圈直徑的大小反映了細(xì)菌分解淀粉的能力。

②H/C值越大，淀粉酶產(chǎn)量越高，因此菌株I淀粉酶產(chǎn)量最高。

（4）題干要求從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實(shí)例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程，可以舉例轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花和基因工程生產(chǎn)人的胰島素兩個(gè)方面闡述，舉例如下：

示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細(xì)菌中克隆 Bt 蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細(xì)胞后進(jìn)行組織培養(yǎng)。經(jīng)對(duì)再生植株中目的基因的檢測(cè)，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。

示例二：基因工程胰島素�？寺∪说囊葝u素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后， 檢測(cè)目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進(jìn)行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素。