Question

【題目】人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值�？蒲腥藛T通過生物工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)HSA基因奶牛，并通過乳腺生物反應器生產(chǎn)HSA，其主要技術(shù)流程如下圖所示：

回答下列問題：

（1）如上圖所示，供核的牛胎兒成纖維細胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細胞，其原因是 _______________________________________________________________。

（2）SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是：提取牛胎兒成纖維細胞的DNA，經(jīng)PCR反應體系擴增SRY基因（Y染色體上特有的性別決定基因）片段，然后對擴增產(chǎn)物進行檢測。

要大量獲得SRY基因，PCR擴增時需要加入兩種引物：__________________（選填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的______________（2分，選填“5’端”或“3’端”）開始延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保______________。除引物外，PCR反應體系中還包含緩沖液、模板DNA、____________和 ____________等成分。通過SRY-PCR法進行性別鑒定，可獲得更多的轉(zhuǎn)HSA基因________牛，以便其通過乳腺生物反應器生產(chǎn)人血清白蛋白。

（3）在胚胎移植操作中，應對供體和受體母牛進行_____________處理，目的是使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。由此可見，胚胎移植的實質(zhì)是_____________________________________________。

Answer 1

【答案】十代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型 引物I和引物IV 3’端 DNA兩條鏈同時被擴增 dNTP 熱穩(wěn)定DNA 聚合酶（Taq 酶） 母 同期發(fā)情 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

【解析】

據(jù)圖分析，圖示涉及到的技術(shù)有基因工程和核移植技術(shù)，先將HAS基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒導入牛胎兒成纖維細胞；接著將導入目的基因的成纖維細胞的細胞核取出，與去核卵母細胞重組形成重組細胞，培養(yǎng)成早期胚胎后移植到代孕母牛體內(nèi)，最終獲得了轉(zhuǎn)基因母牛。

（1）由于10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型，因此圖示供核的牛胎兒成纖維細胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細胞。

（2）在PCR技術(shù)中，DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的3’端開始延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴增，因此圖中要利用PCR技術(shù)擴增SRY基因，應該選擇的引物是引物Ι和引物IV。PCR反應體系中，除了有兩種引物，還應該有緩沖液、模板DNA、dNTP（原料）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶等成分。該實驗是通過乳腺生物反應器生產(chǎn)人血清白蛋白，因此最終獲得的是轉(zhuǎn)HSA基因母牛。

（3）在胚胎移植操作中，應對供體和受體母牛進行同期發(fā)情處理，以使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。由此可見，胚胎移植的實質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。