Question

【題目】人血清白蛋白(HSA) 具有重要的醫(yī)用價值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取___________合成cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。

（2）PCR技術的前提是需要引物，圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出另一條引物的位置及擴增方向_____________。

（3）基因工程中的核心步驟是____________________，該環(huán)節(jié)可使目的基因在受體細胞中___________________________________________作用。啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是____。

A.人血細胞啟動子 B.水稻胚乳細胞啟動子 C.大腸桿菌啟動子 D.農桿菌啟動子

（4）利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，作用是____________。

Answer 1

【答案】總RNA（或mRNA） 基因表達載體的構建 穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮 B 吸引農桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉化

【解析】

基因工程技術的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

3、將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）為獲取HSA基因，可通過反轉錄法，首先需采集人的血液，提取總RNA合成總cDNA。然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。

（2）由于DNA兩條鏈是反向平行的，復制時也是方向相反，如圖中箭頭箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，則另一條引物位于另一條鏈的相反一端，如圖所示

（3）基因工程中的核心步驟是基因表達載體的構建，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。啟動子通常具有物種及組織特異性，故若構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是水稻胚乳細胞啟動子，故選B。

（4）由于酚類物質能夠吸引農桿菌移向受體細胞，并將農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA轉移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體的DNA上，所以利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需要添加酚類物質。