Question

【題目】如圖所示為農桿菌轉化法示意圖。請回答以下問題：

（1）圖中①過程用到的工具酶的特點是_________________________________。下列所示的黏性末端是由_______種限制性核酸內切酶作用產生的。

（2）圖中②過程用到的工具酶是___________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。

（3）圖中④過程的原理是___________。

（4）檢驗基因工程是否成功。首先應檢測___________，這是外源基因能否在真核細胞內___________的關鍵；其次，利用___________法檢測目的基因是否轉錄出相應的mRNA；最后，利用抗原一抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。

Answer 1

【答案】能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子4DNA連接酶基因表達載體的構建植物細胞的全能性轉基因生物的染色體上是否插入外源基因穩(wěn)定遺傳分子雜交

【解析】

（1）圖中①過程所用的酶為限制酶，其特點是能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子。圖中四個黏性末端各不相同，根據(jù)限制酶的特異性可知，這四種黏性末端是由四種不同的限制酶切割形成的。

（2）圖中②過程是將黏性末端連接，形成重組質粒，需要DNA連接酶，基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建。

（3）圖中④過程是利用植物組織培養(yǎng)將外植體培養(yǎng)成植株的過程，原理是植物細胞具有全能性。

（4）基因工程是否成功,需要進行檢測，其中分子水平的檢測：第一步:轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法:DNA分子雜交技術，這是看外源基因能否在真核細胞內穩(wěn)定遺傳的關鍵，第二步:目的基因是否轉錄出了mRNA，方法:分子雜交技術，第三步:目的基因是否翻譯成蛋白質，方法:從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體進行抗原-抗體雜交。