【題目】某植物有A、B兩品種?蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),參照品種B的最佳激素配比(見下表)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

品種B組織培養(yǎng)階段

細(xì)胞分裂素濃度(μmol/L

生長素濃度(μmol/L

Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織

m1

n1

Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽

m2

n2

Ⅲ誘導(dǎo)生根

m3

n3

?

?

據(jù)表回答:

1)Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體,原因是________________。

2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是________________階段。

3)為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度,參照品種B的激素配比(m1>20),以05 μmol/L為梯度,設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn),細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為________μmol/L。

4)Ⅲ階段時(shí),科研人員分別選用濃度低于或高于n3 μmol/L的生長素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果,原因是處理幼芽時(shí),選用低濃度生長素時(shí)的處理方法為________,選用高濃度生長素時(shí)的處理方法為________。

5)在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理,最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。

【答案】細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織??? Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ??? m1+1.0??? 浸泡法(長時(shí)間處理)??? 沾蘸法(短時(shí)間處理)??? ???

【解析】

愈傷組織是由一團(tuán)未分化的細(xì)胞組成的,在組織培養(yǎng)中,條件適宜就會(huì)分化成各種組織。如果培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素的比例合適,會(huì)促進(jìn)愈傷組織的生長,分化出根和莖葉;細(xì)胞分裂素太多時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;生長素用量太多時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;而當(dāng)生長素少,細(xì)胞分裂素也不多時(shí),則愈傷組織繼續(xù)生長,不發(fā)生分化;虻倪x擇性表達(dá)是指基因在特定的時(shí)間和空間條件下有選擇表達(dá)的現(xiàn)象,據(jù)此分析。

(1)在誘導(dǎo)愈傷組織形成時(shí),通常采用莖尖、幼葉做外植體,因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低,全能性容易表達(dá),容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。

(2)Ⅰ過程愈傷組織形成是離體的植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果,脫分化過程中細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生的明顯改變,成為未分化狀態(tài);Ⅱ、Ⅲ過程形成幼芽、根的過程存在細(xì)胞的分化,分化和脫分化都存在基因的選擇性表達(dá),故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段都存在基因的選擇性表達(dá)。

(3)根據(jù)題意,表中數(shù)據(jù)為品種B的最佳激素配比,若要確定品種A的Ⅰ階段最佳細(xì)胞分裂素濃度,以0.5μmol/L為梯度,可參考m1為中間值,故實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞分裂素最高濃度可設(shè)為m1+1.0μmol/L。

(4)實(shí)驗(yàn)中用生長素處理插條的方法可選用浸泡法或沾蘸法,浸泡法時(shí)間長、所需濃度低,而沾蘸法處理時(shí)間短、所需濃度高;因此Ⅲ過程中分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長素處理品種A的幼苗芽,選用低濃度生長素時(shí)的處理方法為浸泡法,時(shí)間長,而選用高濃度生長素時(shí)處理方法為沾蘸法,時(shí)間短,都能達(dá)到比較適宜的濃度,達(dá)到最佳生根效果。

(5)秋水仙素可抑制紡錘體形成,導(dǎo)致染色體加倍形成多倍體,愈傷組織分裂旺盛,故在Ⅰ階段用秋水仙素處理,最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。

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