Question

【題目】請分析回答下列有關現(xiàn)代生物科技方面的問題：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達載體的構建，第三步是將目的的基因導入受體細胞，第四步是 。

①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是 。

②利用PCR技術擴增目的基因的過程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結合，在 酶的作用下延伸形成DNA。

③采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞后，培養(yǎng)該細胞再生成植株的過程中，往往需要使用植物激素，人為地控制 和 過程。

④蛋白質工程的基本程序是：

預期蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有的 序列→找到相對應的 序列。

（2）請回答下列有關單克隆抗體制備的問題：

①與動物細胞融合過程相比，植物體細胞雜交在細胞融合之前要用 處理。作用是去除 ,誘導原生質體融合的化學方法是用 。

②經(jīng)人工誘導后，骨髄痛細胞和產(chǎn)生免疫反應的動物的脾臟細胞中的B淋巴細胞融合。由于可能產(chǎn)生多種融合細胞，因此還需對融合細胞用 進行篩選，目的是選出 它的特點是 。單克隆抗體的特點是 。

Answer 1

【答案】

（1）目的基因的檢測與鑒定

①限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）

②熱穩(wěn)定 DNA聚合

③脫分化 再分化

④氨基酸 脫氧核苷酸

（2）①纖維素酶和果膠酶 細胞壁 聚乙二醇

②選擇性培養(yǎng)基 雜交瘤細胞 既能迅速無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體 特異性強、靈敏度高、并可大量制備

【解析】

（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。�②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定。

①基因工獲取目的基因，需要限制酶，基因表達載體的構建過程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次需要DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子，因此通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。②利用PCR技術擴增目的基因的過程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結合，在DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA，這種DNA聚合酶具有熱穩(wěn)定性。③采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞后，培養(yǎng)該細胞再生成植株的過程中，往往需要使用植物激素，人為地控制細胞的脫分化、再分化。

④蛋白質工程的基本原理是：預期蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的序脫氧核苷酸。

（2）①植物體細胞雜交過程中，在細胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理，以去除細胞壁，誘導原生質體融合的化學方法是用聚乙二醇。

②經(jīng)人工誘導后，骨髓瘤細胞和產(chǎn)生免疫反應的動物的脾臟細胞中的B淋巴細胞融合，由于可能產(chǎn)生多種融合細胞，因此還需對融合細胞進行選擇性培養(yǎng)基，來篩選和檢測，從而獲得符合要求的雜交瘤細胞。通過能產(chǎn)生單一抗體的效應B細胞（漿細胞）和骨髓瘤細胞雜交，形成的雜交瘤細胞既能產(chǎn)生特定的抗體，又能無限增殖，通過培養(yǎng)雜交瘤細胞獲得的抗體即為單克隆抗體，單克隆抗體的特點是靈敏度高、專一性強，可大量制備。