Question

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關。獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖。

(1)將KIFⅡ基因導入目的基因的細胞內，獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊這種新性狀的產生所依據的原理是____________。從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因可用_________技術進行擴增。過程①中最常用的運載工具是 。

(2)在過程②中，用___________處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于_____________混合的氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。培養(yǎng)液中加入__________達到無菌環(huán)境。

(3)在過程③中，用______________處理以獲取更多的卵（母）細胞,在體外培養(yǎng)到______________期通過顯微操作進行去核處理。

(4)從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是___________。在胚胎移植前，通過_________技術可獲得較多胚胎。

Answer 1

（1）基因重組 PCR 質粒

（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 95%空氣加5%CO2 （一定量的）抗生素

（3）促性腺激素 減數第二次分裂中（或MII）

（4）（早期）胚胎培養(yǎng) 胚胎分割

【解析】

試題分析：（1）將KIFⅡ基因導入目的基因的細胞內，獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的過程采用了轉基因技術，該技術依據的原理是基因重組；從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因可用PCR技術進行擴增；基因工程中常用的運載工具（體）包括質粒、λ噬菌體的衍生物及動植物病毒，其中質粒是最常用的運載工具。

（2）過程②為動物細胞培養(yǎng)過程，該過程中需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理一段時間，使皮膚組織塊分散成單個的成纖維細胞；在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加（一定量的）抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的污染，達到無菌環(huán)境。

（3）過程③表示活體采卵，該過程中需用促性腺激素處理母羊使其超數排卵，以獲取更多的卵（母）細胞，在體外培養(yǎng)到減數第二次分裂中期時即可通過顯微操作進行去核處理。

（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是（早期）胚胎培養(yǎng)；在胚胎移植前，可通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎。

考點：本題考查基因工程、動物細胞培養(yǎng)、核移植、胚胎分割等的相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構的能力。