Question

【題目】（三）生物技術(shù)及生命科學(xué)的應(yīng)用。

下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。

1. 若圖2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，現(xiàn)在要培養(yǎng)乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需將該基因與質(zhì)粒重組后，通過顯微注射法（方法）注入到羊的中，則發(fā)育成的羊（轉(zhuǎn)基因羊）有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。該轉(zhuǎn)基因羊的培育涉及的過程有____（多選）。

A. DNA 自我復(fù)制

B. DNA 以其一條鏈為模板合成RNA

C. RNA 自我復(fù)制

D. 按照RNA 上密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)

2. 轉(zhuǎn)基因技術(shù)中通常用圖1 中質(zhì)粒作為載體，質(zhì)粒的本質(zhì)是_____。與轉(zhuǎn)基因羊相比，克隆多利羊的誕生所運(yùn)用的生物技術(shù)是____，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是____。

3. 用圖1中質(zhì)粒和圖2目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用____兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過____酶作用后獲得重組質(zhì)粒。

4. 若BamH I酶切的DNA 末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個(gè)堿基對序列為______。

5. 蛋白酶具有廣泛的應(yīng)用前景，所以常產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，如果蛋白酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時(shí)不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的活性，則應(yīng)選擇圖3中的____（A/B/C）固定化工藝。

Answer 1

【答案】

【1】 ABD

【2】 小型雙鏈閉環(huán)的DNA分子 細(xì)胞核移植 細(xì)胞核全能性

【3】 BclI和Hind Ⅲ DNA連接

【4】

【5】 C

【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：在質(zhì)粒上存在BamHI、BclⅠ、BamHI和HindⅢ等四個(gè)酶切位點(diǎn)，其中BamHI的切割位點(diǎn)在兩個(gè)抗性基因上都有，而抗性基因?yàn)檩d體的標(biāo)記基因，因此不可用該酶切割；在目的基因上，BclⅠ、BamHI、HindⅢ和Sau3AⅠ四種酶也存在酶切位點(diǎn)，因此為防止任意連接，且在必須具備標(biāo)記基因的情況下，應(yīng)該選擇的限制酶是BclI和Hind Ⅲ。

【1】轉(zhuǎn)基因羊的遺傳物質(zhì)是DNA，會(huì)發(fā)生DNA的復(fù)制，A正確；目的基因表達(dá)產(chǎn)生α-抗胰蛋白酶的乳汁的過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，其中轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，B正確；轉(zhuǎn)基因的遺傳物質(zhì)是DNA，RNA不能復(fù)制，C錯(cuò)誤；翻譯是按照RNA 上密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)的過程，D正確。

【2】質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中的小型雙鏈閉環(huán)的DNA分子；與轉(zhuǎn)基因羊相比，克隆多利羊的誕生所運(yùn)用的生物技術(shù)是細(xì)胞核移植，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

【3】根據(jù)以上分析已知，用圖1中質(zhì)粒和圖2目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用BclI和Hind Ⅲ兩種限制酶切割，并將切割后的質(zhì)粒與目的基因利用DNA連接酶連接。

【4】根據(jù)表格分析，用BamH I酶切的DNA 末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個(gè)堿基對序列為。

【5】據(jù)圖分析，ABC固定化酶的方法分別對應(yīng)交聯(lián)法、吸附法、包埋法，其中包埋法需要其活性在固定化處理時(shí)不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，故選C。