Question

16．請(qǐng)回答下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的相關(guān)問題：
（1）從蘇云金芽孢桿菌的DNA上獲取抗蟲基因，需要用到的工具酶是限制酶，它能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．
（2）培育過程中構(gòu)建的重組DNA分子包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、終止子和啟動(dòng)子．
（3）若檢測(cè)目的基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上，方法是DNA分子雜交技術(shù)；若檢測(cè)目的基因是否翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，方法是抗原-抗體雜交．
（4）將已導(dǎo)入目的基因的棉花細(xì)胞培育成幼苗，需經(jīng)過脫分化和再分化兩個(gè)過程．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取目的基因需要用限制酶，它能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．
（2）該培育過程中構(gòu)成的重組DNA分子包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、終止子和啟動(dòng)子．
（3）用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上，用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)．
（4）將已導(dǎo)入目的基因的棉花細(xì)胞培育成幼苗利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，需經(jīng)過脫分化和再分化兩個(gè)過程．
故答案為：
（1）限制酶    特定核苷酸序列    磷酸二酯
（2）啟動(dòng)子
（3）DNA分子雜交技術(shù)   抗原-抗體雜交
（4）脫分化    再分化

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．