Question

【題目】【現(xiàn)代生物科技專題】拉克斯是由內蒙古農業(yè)大學培育的世界首例轉基因低乳糖奶牛，誕生于2012年4月24日。它的誕生給世界患乳糖不耐癥的消費群體帶來希望。

（1）導入拉克斯的乳糖酶基因需要與___________結合后，才能導入___________（細胞）中，—般導入方法為___________。

（2）之后在體外培養(yǎng)該細胞時，必須滿足無菌無毒、營養(yǎng) 、___________、氣體環(huán)境等條件，才能使細胞大量增殖，培養(yǎng)環(huán)境中的無菌空氣必須加5%的CO2，目的是______________________。

（3）為驗證外源基因整合到奶�；�因組后是否轉錄，可從轉基因奶牛的細狍中提取mRNA并反轉錄成_______，由于反轉錄產物含量少，故需要利用特異性引物進行基因的體外擴增，該方法稱為______技術。

Answer 1

【答案】 載體 （奶牛）受精卵 顯微注射法 合適的溫度和pH 維持培養(yǎng)液的pH （c）DNA PCR（或聚合酶鏈式反應）

【解析】試題分析：基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）拉克斯的乳糖酶基因是目的基因，需要先與運載體結合，才能通過顯微注射法導入（奶牛）受精卵。

（2）導入目的基因的受精卵經過動物細胞培養(yǎng)技術，進行細胞增值，該過程需要滿足無菌無毒、營養(yǎng)、合適的溫度和pH、氣體環(huán)境等條件，培養(yǎng)環(huán)境中的無菌空氣必須加5%的CO2的目是維持培養(yǎng)液的pH。

（3）mRNA反轉錄形成的是DNA，由于獲取的該DNA分子量較少，可以用PCR技術進行擴增。