Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)一些嗜冷細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，導(dǎo)致牛奶變質(zhì)。為了篩選檢測變質(zhì)牛奶中的嗜冷細(xì)菌，某研學(xué)小組做了如圖所示實驗。(注:培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目)，請回答下列問題：

（1）牛奶飲用前要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，與煮沸消毒相比，巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時間較短，原因是__________,導(dǎo)致牛奶中營養(yǎng)成分被分解而變質(zhì)。

（2）若要篩選嗜冷細(xì)菌，應(yīng)將牛奶樣品稀釋液接種在以_________為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在______的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細(xì)菌生長，抑制或阻止其他微生物的生長。

（3）據(jù)圖分析,研學(xué)小組采用的是________________法分離和計數(shù)嗜冷細(xì)菌。

（4）用上述方法統(tǒng)計樣本中菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組？_______（填“需要”或“不需要”），其原因是___________________________________。

（5）按照菌落計數(shù)的要求，據(jù)圖可得出1ml牛奶樣品中嗜冷細(xì)菌的活菌數(shù)為__________個，與用血球計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)目較_______。

Answer 1

【答案】（巴氏消毒的）牛奶中沒有被殺死的微生物（或細(xì)菌）在適宜溫度（或常溫）下大量繁殖 乳蛋白 低溫（或較低溫度） 稀釋涂布平板 需要 需要證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格） 3.9×105 少

【解析】

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等。消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等。稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計數(shù)。

（1）由于巴氏消毒的溫度為75~80°C之間，有些微生物在此溫度下沒有被殺死，故在適宜溫度（或常溫）下，（巴氏消毒的）牛奶中沒有被殺死的微生物（或細(xì)菌）會大量繁殖，導(dǎo)致牛奶中營養(yǎng)成分被分解而變質(zhì)。所以巴氏消毒的牛奶在常溫（約28℃）下保存時間較短。

（2）由于嗜冷細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白酶可使乳蛋白分解，故要篩選嗜冷細(xì)菌，應(yīng)將牛奶樣品稀釋液接種在以乳蛋白為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，并且在低溫的環(huán)境條件下培養(yǎng)，以利于嗜冷細(xì)菌生長，抑制或阻止其他微生物的生長。

（3）根據(jù)圖示中將牛奶樣品稀釋后涂在培養(yǎng)基上進(jìn)行菌落計數(shù)，可知研學(xué)小組采用的是稀釋涂布平板法分離和計數(shù)嗜冷細(xì)菌。

（4）由于不知道制備的培養(yǎng)基是否被污染，故需要設(shè)置不接種微生物的培養(yǎng)基進(jìn)行對照，以證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）。

（5）菌體計數(shù)時應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300之間的稀釋倍數(shù)進(jìn)行計數(shù)，由圖中菌落數(shù)量可知，應(yīng)選擇稀釋103的進(jìn)行計數(shù)，故1ml牛奶樣品中嗜冷細(xì)菌的活菌數(shù)為（36+39+42）÷3÷0.1×103=3.9×105個。該種方法計數(shù)時，計數(shù)的是活菌的數(shù)量，且當(dāng)兩個或多個菌體連在一起生長時，平板上觀察的只是一個菌落，故與用血球計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)目較小。