Question

【題目】在植物的生態(tài)環(huán)境中，存在著各種各樣的微生物，它們有的附著于植物表面，有的則生活于植物體內。有資料顯示，一些植物內生微生物與宿主發(fā)生關聯(lián)時，可明顯增強宿主的抗病性，提高植物的生產力．以下為從菠菜葉中分離內生細菌，篩選出對菠菜枯萎病菌有拮抗作用的菌株的過程。

（步驟一 菠菜葉內生細菌的分裂）

（1）取0.1g菠菜葉，經70%酒精和0.2%升汞進行消毒后，接種于培養(yǎng)基上．培養(yǎng)48h后，沒有觀察到菌落．這說明_____．

A．菠菜葉表面微生物已被殺死 B．菠菜葉內在微生物已被殺死

C．菠菜葉內不存在內在細菌 D．菠菜葉細胞已被全部殺死

（2）將上述0.1g菠菜葉放入無菌研缽中，加入一定量的水，研磨成勻漿．此過程中的水應是_____。

A．蒸餾水 B．自來水 C．無菌水 D．純凈水

（3）將菠菜葉研磨液接種至培養(yǎng)基上，30℃黑暗培養(yǎng)48h獲得菌落．為進一步獲得單菌落，挑出形態(tài)大小有差異的菌落，可采用_____法接種在_____培養(yǎng)基上純化培養(yǎng)。

（步驟二 菠菜枯萎病毒拮抗菌株的篩選）

（4）在平板培養(yǎng)基中央接種入菠菜枯萎病菌菌塊，在四個點各接種入一小環(huán)單菌落菌株，同時設置對照，如圖.28℃黑暗培養(yǎng)3d，觀察發(fā)現(xiàn)對照平板上長滿菠菜枯萎病菌，而實驗平板上的單菌落菌株周圍出現(xiàn)透明圈．此現(xiàn)象說明_____。

（步驟三 菠菜葉內生細菌種類的鑒定）

（5）對單菌落菌株進行生理生化鑒定，確定菌種為一種芽孢桿菌．以下可能是該菌種特征的是_____．

A．有菌蓋 B．有質膜 C．能形成莢膜 D．嚴格厭氧 E．可能存在抗利福平基因

Answer 1

【答案】A C 劃線法 固體 單菌落菌株對菠菜枯萎病菌有拮抗作用 BCE

【解析】

菌落是由單個細菌（或其他微生物）細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見的子細胞群落；因為每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征，包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、顏色和透明程度等。不同種或同種在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的。

（1）根據題意可知培養(yǎng)48h后，沒有觀察到菌落，說明經70%酒精和0.2%升汞進行消毒后，菠菜葉表面微生物已被殺死了。

故選A。

（2）為了控制無菌條件，應該用無菌水。

故選C。

（3）為進一步獲得單菌落，一般采用在固體培養(yǎng)基進行平板劃線法的接種方法。

（4）在實驗平板上的單菌落菌株周圍出現(xiàn)透明圈說明了單菌落菌株對菠菜枯萎病菌有拮抗作用。

（5）芽孢桿菌有質膜；能形成莢膜；可能存在抗利福平基因，具有抗利福平的能力。

故選BCE。