Question

【題目】對(duì)硝基苯酚（PNP）（分子式為C6H5N03）顏色為黃色，若被分解則顏色消失，屬于硝基苯酚類有機(jī)化合物的一種，主要來源于農(nóng)藥、醫(yī)藥、染料、塑料等生產(chǎn)企業(yè)排放，并廣泛分布于環(huán)境 中，對(duì)植物、微生物和動(dòng)物均有毒性。某生物興趣小組提出從污水廠曝氣池長期馴化的污泥中 分離出對(duì)硝基苯酚降解菌并研究其降解特性�；卮鹣铝袉栴}：

（1）分離對(duì)硝基苯酚降解菌常用________________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，此培養(yǎng)基成分應(yīng)如何設(shè)置才能達(dá)到分離的目的？_________。

（2）制備培養(yǎng)基的過程包括：計(jì)算→稱重→溶化→滅菌→________，常用________方 法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。

（3）利用________（方法）分離純化得到單一的對(duì)硝基苯酚降解菌菌落，可以將在菌落周圍是否產(chǎn)生________作為篩選標(biāo)記。

（4）分離純化所得菌種如需長期保存可采用________的方法。

Answer 1

【答案】選擇??? 以PNP為唯一的碳源或氮源??? 倒平板??? 高壓蒸汽滅菌??? 稀釋涂布平板法或平板劃線法??? 透明圈??? 甘油管藏???

【解析】

本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖欠蛛x分解對(duì)硝基苯酚的細(xì)菌，因此應(yīng)當(dāng)配制以對(duì)硝基苯酚為唯一氮源和碳源的培養(yǎng)基；微生物的培養(yǎng)過程中，常用來分離微生物的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線分離法；進(jìn)行平板劃線操作時(shí)，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連；稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來源于（稀釋液中的）一個(gè)活菌，由于菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞形成，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往少于稀釋液中的活菌數(shù)。

（1）為了篩選污泥中可分解對(duì)硝基苯酚的細(xì)菌，常用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，此培養(yǎng)基成分應(yīng)以PNP為唯一的碳源或氮源即可分離。

（2）制備培養(yǎng)基的過程包括：計(jì)算→稱重→溶化→滅菌→倒平板，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌。

（3）常用來分離微生物的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線分離法，對(duì)硝基苯酚降解菌能分解對(duì)硝基苯酚，故將在菌落周圍出現(xiàn)透明圈。

（4）分離純化所得菌種如需長期保存可采用甘油管的方法。