Question

【題目】下圖是從土壤中篩選細(xì)菌的過程。請(qǐng)回答下列問題：

（1）土壤中存在能分解尿素的細(xì)菌，這些細(xì)菌中的脲酶催化尿素分解成___________。因此，圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為微生物營(yíng)養(yǎng)中唯一___________。鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作___________。

（2）在向培養(yǎng)基接種土壤稀釋液中微生物時(shí)，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。此外，微生物接種技術(shù)還包括___________、___________等方法。

（3）若在3個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品0．1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間，平板上菌落數(shù)分別為35個(gè)、33個(gè)、34個(gè)，則可推測(cè)每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為___________個(gè)。 運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值___________（填“偏大”或“偏小”），原因是___________。

Answer 1

【答案】氨 氮源 指示劑 斜面接種 穿刺接種 3．4×107 偏小 個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成

【解析】

1．培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。
2．鑒定分解尿素的細(xì)菌：細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠產(chǎn)生脲酶，并分解尿素。
3．微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）土壤中存在能分解尿素的細(xì)菌，這些細(xì)菌中的脲酶催化尿素分解成氨。因此，圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為微生物營(yíng)養(yǎng)中唯一氮源。鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。

（2）在向培養(yǎng)基接種土壤稀釋液中微生物時(shí)，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。此外，微生物接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種等方法。

（3）若在3個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品0．1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間，平板上菌落數(shù)分別為35個(gè)、33個(gè)、34個(gè)，則可推測(cè)每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為（35+33+34）÷3×105÷0.1=3．4×107個(gè)。 運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏小，原因是個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成。