Question

【題目】大腸桿菌是人和動物腸道中普遍存在的一種兼性厭氧菌，在無氧條件下，大腸桿菌通過發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N有機酸并產(chǎn)生CO2等氣體。某研究機構(gòu)使用“濾膜法”對受污染的河流水體進行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測定。請回答下列問題：

(1)為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入________________________作為指示劑。

(2)測定大腸桿菌活菌數(shù)目時，需制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中為細菌提供氮源的物質(zhì)是__________________。

(3)為了便于統(tǒng)計污染嚴重的水體中活菌的數(shù)目，需將水樣進行適當(dāng)稀釋，例如取水樣1 mL加入無菌水________________ mL制備稀釋倍數(shù)為102的稀釋液，并照此依次制備更高倍數(shù)的稀釋液。每個稀釋倍數(shù)的菌液取10 mL進行過濾，然后將濾膜放置在培養(yǎng)基上。為了防止雜菌污染，稀釋、過濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作都應(yīng)該在________附近進行。

(4)將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12 h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目________時的記錄作為結(jié)果。如果經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為102的4個平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48，那么每升河水中約含大腸桿菌________個。用這種方法測定的細菌數(shù)量比實際活菌數(shù)量要少，這是因為________________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】 伊紅－美藍 牛肉膏和蛋白胨 99 酒精燈火焰 穩(wěn)定 4.5×106 當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落

【解析】試題分析：水中大腸桿菌的檢測可以用濾膜法進行，可以用伊紅美蘭培養(yǎng)基進行鑒別；活菌計數(shù)法應(yīng)取幾個平板上菌落的平均數(shù)來計算，計算方法為菌落數(shù)÷菌液體積×稀釋倍數(shù)。

(1)為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍作為指示劑，觀察是否出現(xiàn)深紫色并伴有金屬光澤的菌落。

(2)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中為細菌提供氮源的物質(zhì)是牛肉膏和蛋白胨。

(3)對水樣進行稀釋時，取水樣1 mL加入無菌水99 mL可制備稀釋倍數(shù)為102的稀釋液。為了防止雜菌污染，稀釋、過濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作都應(yīng)該在酒精燈火焰附近的無菌區(qū)進行。

(4)將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12 h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為102的4個平板上菌落數(shù)平均為(43＋47＋42＋48)÷4＝45(個)，那么每升河水中約含大腸桿菌45×102×1 000＝4.5×106(個)。由于當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落，所以用這種方法測定的細菌數(shù)量比實際活菌數(shù)量要少。