Question

【題目】雜交瘤細(xì)胞制備示意圖如下。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT－），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。據(jù)圖回答下列問題：

（1）細(xì)胞融合的原理是_____________，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合特有的方法是__________________________。

（2）選擇免疫B細(xì)胞是因為其_____________，且使雜交瘤細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)液中生存。雜交瘤細(xì)胞制備利用了骨髓瘤細(xì)胞的_____________特點。雜交瘤細(xì)胞具備兩種細(xì)胞的優(yōu)勢。

（3）利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)_____________抗體，還需要進(jìn)一步的多次篩選，原因是_____________。

（4）將最終獲得的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到_____________內(nèi)增殖，一段時間后從相應(yīng)的材料中獲取抗體。

Answer 1

【答案】細(xì)胞膜的流動性 滅活的病毒（或“滅活的仙臺病毒”等） 能產(chǎn)生特異性（單一）抗體（但不能無限增殖） （在體外培養(yǎng)條件下）能無限增殖（但不能產(chǎn)生抗體） 單克隆 每一種免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）只能產(chǎn)生一種抗體，免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）的種類多，雜交瘤細(xì)胞種類多，需要篩選能分泌所需要抗體的細(xì)胞 小鼠腹腔

【解析】

據(jù)圖分析，免疫B細(xì)胞具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT+），但不能在體外培養(yǎng)；骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT－），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長，最后死亡；而B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中可以存活，據(jù)此分析。

（1）細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動性，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒），后者是動物細(xì)胞融合所特有的方法。

（2）免疫B細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞經(jīng)過某抗原反復(fù)刺激后增殖分化形成的，能產(chǎn)生特異性抗體，但不能無限增殖，其具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT+），使雜交瘤細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)液中生存。制備雜交瘤細(xì)胞利用了骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特點，故雜交瘤細(xì)胞具備兩種細(xì)胞的優(yōu)勢。

（3）由于每一種免疫B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，而機體產(chǎn)生的免疫B細(xì)胞的種類多，導(dǎo)致雜交瘤細(xì)胞種類也很多，因此利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體時，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)過多次篩選，才可獲得能分泌所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（4）將最終獲得的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，一段時間后從相應(yīng)的材料中獲取抗體。