Question

13．某研究小組為測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性，準備對某種動物的肝腫瘤細胞（甲）和正常肝細胞（乙）進行動物細胞培養(yǎng)．下列敘述正確的是（　�。�

• A． 制備肝細胞懸液時，可用胃蛋白酶處理肝組織塊
• B． 恒溫培養(yǎng)箱中的CO₂濃度維持在10%左右，以維持培養(yǎng)液正常pH
• C． 為了保證細胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境，需大量添加各種抗生素
• D． 本實驗應(yīng)設(shè)置對照實驗，以檢測藥物對甲、乙的毒性大小

Answer 1

分析 本題主要考查動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識．
1、動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．（3）溫度和PH．（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的pH值）．

解答 解：A、在利用肝組織塊制備肝細胞懸液時，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶需要在強酸環(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細胞生存，A錯誤；
B、細胞培養(yǎng)應(yīng)在含C0₂恒溫培養(yǎng)箱中進行，C0₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH值，B錯誤；
C、抗生素是用來殺菌的，不是殺病毒的，C錯誤；
D、本實驗應(yīng)設(shè)置對照實驗，用添加甲藥物、乙藥物的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)細胞，根據(jù)變異細胞占培養(yǎng)細胞的比例，以檢測藥物對甲、乙的毒性大小，D正確．
故選：D．

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查學生的識記和理解能力，難度不大．