Question

【題目】（生物技術實踐）

尿素是一種重要的農業(yè)氮肥，但不能被農作物直接吸收，土壤中有一種好氧型細菌能把尿素分解成氨。欲從土壤中篩選出能分解尿素的細菌并予以純化計數，采用了如圖所示的基本操作流程。

請回答下列問題：

（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生______________。

（2）能在該選擇培養(yǎng)基上生長的細菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素，若在平板中加入酚紅，目的菌落出現的變化是_______________。

（3）篩選得到的菌落可以采用平板劃線法進一步純化,每次劃線后接種環(huán)必須____________，才能再次用于劃線。純化獲得的菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是_____________________。

（4）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有和，其作用有__________________。（答出兩點）

Answer 1

【答案】脲酶 不一定 周圍指示劑變紅(或周圍出現紅圈) 灼燒并冷卻 細菌有氧呼吸需要氣體流通 為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中PH穩(wěn)定

【解析】

1、欲從土壤中篩選出能分解尿素（產生脲酶）的細菌，所用培養(yǎng)基必須以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基；尿素分解菌在該選擇培養(yǎng)基上能產生脲酶；尿素分解菌產生的脲酶能將尿素分解成氨，氨是堿性物質，可使酚紅指示劑變紅。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)；在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）根據以上分析可知，尿素分解菌能夠產生脲酶將尿素分解為氨，而不能產生脲酶的細菌不能利用尿素為氮源。

（2）由于固氮菌也能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長，所以在該選擇培養(yǎng)基上生長的細菌不一定都能產生脲酶；尿素分解菌產生的脲酶能將尿素分解成氨，氨是堿性物質，可使酚紅指示劑變紅。

（3）采用平板劃線法進一步純化時，每次劃線后接種環(huán)必須灼燒并冷卻，才能再次用于劃線。純化獲得的尿素分解菌是一種好氧型細菌，其有氧呼吸需要氣體流通，故將該菌種保存在試管中時不能密封。

（4）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，一是其作為無機鹽可以為細菌生長提供無機營養(yǎng)，二是作為緩沖劑保持細胞生長過程中PH穩(wěn)定。