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【題目】下圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題:

(1)步驟一中,向雞血細胞液中加入________并攪拌,可使雞血細胞破裂。

(2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的___________________

(3)步驟三、四的操作原理是_____________________________,步驟四通過向溶液中加入________調節(jié)NaCl溶液的物質的量濃度,為________mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質。

(4)步驟七:向步驟六過濾后的________中,加入等體積的冷卻的________,靜置2~3 min,溶液中會出現(xiàn)________色絲狀物,這就是粗提取的DNA。

(5)步驟八:DNA遇________試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈________色。

【答案】 蒸餾水 濾液 DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質 蒸餾水 0.14 濾液 酒精 二苯胺

【解析】試題分析:DNA粗提取和鑒定的過程:(1)實驗材料的選取:凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。(2)破碎細胞,獲取含DNA的濾液:動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可.如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜.例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。(3)去除濾液中的雜質:方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質,不分解DNA;方案三的原理是蛋白質和DNA的變性溫度不同。(4)DNA的析出與鑒定:①將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分;②取兩支20ml的試管,各加入物質的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解.然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑。混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍。

(1)步驟一中,利用滲透原理,向雞血細胞液中加入蒸餾水并攪拌,可使雞血細胞破裂

(2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的濾液。

(3)步驟三、四的操作原理是DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;步驟四通過向溶液中加入蒸餾水調節(jié)NaCl溶液的物質的量濃度為0.14mol/L(此時DNA的溶解度最。⿻r,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質

(4)步驟七:向步驟六過濾后的濾液中,加入等體積的冷卻的酒精,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA。

(5)步驟八:DNA遇二苯胺試劑,沸水浴5min,冷卻后,溶液呈藍色

練習冊系列答案
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B第一次分裂異常,第二次分裂異常

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a鏈5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)

b鏈3′—C—C……A—G—5′  (引物Ⅱ)

   95 ℃↓

5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′

   55 ℃↓

           5′—G—G—OH

5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′

   72 ℃↓

(1)在相應的橫線上寫出引物Ⅱ,并在復性這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。__________________

(2)在相應的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。________

(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標記,請分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點:________,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為________

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