Question

(15分)生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如左表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如右圖所示。請(qǐng)分析回答問題：

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是___________，原理是_____________。從同化作用類型來看的，該菌屬于____________________。

（2）實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是______________。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

（3）在實(shí)驗(yàn)過程中：①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體。其中需要滅菌是____________（填序號(hào)）。

（4）分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。甲同學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異的原因可能有__________（填序號(hào)）

①取樣不同 ②培養(yǎng)基污染 ③操作失誤 ④沒有設(shè)置對(duì)照

（5）以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)“目的菌”后，加入_________指示劑后變紅色，說明“目的菌”能分解尿素。理由是_____________________。

（6）為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計(jì)具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中_____________倍的稀釋比較合適。

Answer 1

（1）篩選目的菌 只有能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素，在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

異養(yǎng)型

（2）為目的菌提供氧氣 涂布平板法 （3）①和② （4）①②③

（5）酚紅指示劑 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使酚紅指示劑變紅(2分)

（6）106或105

【解析】

試題分析：

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選能高效降解尿素的目的菌，其原理是只有能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素，才能在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；由于培養(yǎng)基中需要的碳源為葡萄糖，說明該菌不能自己制造有機(jī)物，為異養(yǎng)型生物。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是為目的菌提供氧氣；轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，要想獲得單個(gè)菌落，最好采用稀釋涂布平板法。

（3）在實(shí)驗(yàn)中，為了防止雜菌污染，對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻璃棒、試管、錐形瓶、吸管等培養(yǎng)器具要進(jìn)行滅菌處理，即對(duì)①②進(jìn)行滅菌，瘤胃中的液體是實(shí)驗(yàn)材料，不能滅菌。

（4）甲同學(xué)培養(yǎng)的菌落較多，可能是取樣不同造成的，也可能是培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基被污染或操作失誤，即①②③會(huì)造成菌落數(shù)增多。

（5）目的菌中的脲酶能把培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，氨可以使培養(yǎng)基中的pH升高，從而是酚紅指示劑變紅。

（6）分析表格中數(shù)據(jù)，當(dāng)稀釋倍數(shù)為106或105時(shí)，菌落數(shù)分別是36和248個(gè)，為30～300之間。

考點(diǎn)：本題考查微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。