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某化工廠的污水池中含有一種有害的、難以降解的有機化合物A,研究人員利用以下兩種方法獲得了能高效降解化合物A的細菌。

Ⅰ 方法一:研究人員利用有機化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基成功篩選到能高效降解化合物A的細菌。實驗的主要步驟如下圖所示,請分析回答:

(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________________。

(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_______________。實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是_________________。

(3)在上述實驗操作過程中,獲得純凈“目的菌”的關鍵是________________________。

(4)轉為固體培養(yǎng)時,常采用_____________的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

(5)若研究“目的菌”的群體生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培養(yǎng),可采用顯微直接計數法進行計數。若以一個大方格(體積為0.4mm3)有25個中方格的計數板為例進行計算,設五個中方格中總菌數為B,菌液稀釋倍數為C,那么原菌液的菌群密度為_________________個/mL。

Ⅱ 方法二:研究人員通過化學方法合成了高效降解化合物A的某種酶的基因,利用PCR擴增后,采用一定方法導入細菌細胞中,經篩選、培養(yǎng)獲得高效降解化合物A的細菌。請分析回答:

(1)在利用PCR擴增該酶的基因時,在擴增緩沖液中添加4種脫氧核苷三磷酸作為原料而不是脫氧核苷酸,從而使反應體系不需要再加入ATP提供能量,請推測PCR反應合成DNA子鏈時能量來源于______________________。

(2)假如PCR反應所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,則經過n次循環(huán),具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數的比值為 _____________。

練習冊系列答案
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