Question

【題目】重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發(fā)情，產仔率高等優(yōu)點，可以作為乳腺生物反應器批量生產藥物。下圖是利用轉基因兔生產重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過程，請據圖回答。

(1)構建rhPA基因表達載體需要用限制酶______切割質粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達載體需用__________________酶切割重組質粒使之線性化。

(2)對母兔注射__________使其超數排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達載體導入家兔受精卵中最有效的導入技術是_____________。

(3)將受精卵置于37 ℃的95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經_______________處理。

(4)子代兔需要經過篩選過程才能獲得生產人纖溶酶原激活劑的生物反應器，原因有____________________________________、________________________________________。

Answer 1

【答案】XhoⅠ Sal Ⅰ和NotⅠ 促性腺激素 顯微注射技術 同期發(fā)情(發(fā)情/孕激素) 只有部分子代兔導入了人纖溶酶原激活劑基因 公兔不能表達人纖溶酶原激活劑基因

【解析】

動物乳腺生物反應器是基于轉基因技術平臺，使外源基因導入動物基因組中并定位表達于動物乳腺，利用動物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產一些具有重要價值產品的轉基因動物的總稱。
乳腺生物反應器是最理想的生物反應器，它的優(yōu)點：（1）藥物蛋白只在乳腺內，對動物的生理活動不影響。（2）長期收集也不會對動物造成傷害。（3）產品成本低。（4）無論純化還是使用都很方便。

（1）據圖分析可知，構建rhPA基因表達載體需要用限制酶XhoⅠ切割質粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達載體需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重組質粒使之線性化。

（2）對母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達載體導人家兔受精卵中最有效的導人技術是顯微注射技術。

（3）將受精卵置于37℃的95%空氣和5%CO2氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經同期發(fā)情（孕激素）處理。

（4）只有部分子代兔導入了人組織纖溶酶原激活劑基因、公兔不能表達人組織纖溶酶原激活劑，故子代兔需要經過篩選過程才能獲得生產人組織纖溶酶原激活劑的生物反應器。