Question

細(xì)胞融合技術(shù)可制備抗X病毒單克隆抗體．請(qǐng)分析回答：
（1）將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射X病毒，其目的是

 

，乙組注射

 

作為陰性血清

 

對(duì)照
（2）免疫一段時(shí)間后，取甲組小鼠脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，融合時(shí)需加入

 

試劑誘導(dǎo)融合，細(xì)胞融合的原理是

 

（3）利用特殊的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)融合細(xì)胞一定時(shí)間后，培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的就僅有雜交瘤細(xì)胞

 

，細(xì)胞都會(huì)死亡．雜交瘤細(xì)胞不同于小鼠脾臟細(xì)胞的特性是

 

．
（4）用多孔培養(yǎng)板培芥雜交瘤細(xì)胞并收集上清液，收集上淸液的原因是

 

o將上清液加入到另一個(gè)預(yù)先包埋好

 

的培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)．將陽(yáng)性孔中的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，檢測(cè)并選擇單個(gè)產(chǎn)生抗體能力強(qiáng)和抗體特異性強(qiáng)的雜交瘤細(xì)胞植入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行

 

培養(yǎng)，可從腹水中提取到單克隆抗體．
（5）為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原因

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：制備單克隆抗體，需對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選，注入抗原，看是否發(fā)生凝集反應(yīng)，通常實(shí)驗(yàn)要做對(duì)照實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組注入一定量的抗原，對(duì)照組注入等量不含抗原的溶液，低溫保存是利用酶在低溫條件下活性被抑制而不變性利于保存其特性．

解答： 解：（1）本實(shí)驗(yàn)屬于對(duì)照類(lèi)實(shí)驗(yàn)．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射X病毒，其目的是引起小鼠產(chǎn)生對(duì)X病毒的免疫應(yīng)答，并使抗體達(dá)到一定濃度，乙組作為空白對(duì)照組，應(yīng)注射等量的生理鹽水．
（2）動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑為聚乙二醇，細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性．
（3）特殊的選擇培養(yǎng)基篩選的目的為篩選出雜交瘤細(xì)胞，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡．雜交瘤細(xì)胞集合效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的遺傳特點(diǎn)，即既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無(wú)限增殖，而不小鼠脾臟細(xì)胞不能無(wú)限增殖．
（4）由于抗體主要分布在上清液中，因此用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞并收集上清液．將上清液加入到另一個(gè)預(yù)先包埋好X病毒的培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)．將陽(yáng)性孔中的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，檢測(cè)并選擇單個(gè)產(chǎn)生抗體能力強(qiáng)和抗體特異性強(qiáng)的雜交瘤細(xì)胞植入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行克隆培養(yǎng)，可從腹水中提取到單克隆抗體．
（5）超低溫抑制了酶的活性，利于細(xì)胞特性的長(zhǎng)期保存，因此可用超低溫將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行凍存，用來(lái)保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系．
故答案為：
（1）引起小鼠產(chǎn)生對(duì)X病毒的免疫應(yīng)答，并使抗體達(dá)到一定濃度    等量生理鹽水 
（2）PEG  細(xì)胞膜的流動(dòng)性 
（3）未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的  能無(wú)限增值 
（4）抗體被分泌到上清液中   X病毒  克隆 
（5）超低溫抑制了酶的活性，利于細(xì)胞特性的長(zhǎng)期保存．

點(diǎn)評(píng)：本題考查了單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理，能對(duì)一些簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂的能力．