(10分)萌發(fā)的小麥種子中的淀粉酶主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐熱)、β-淀粉酶(不耐熱,70°C條件下15min后就失活,但耐酸)。以下是以萌發(fā)的小麥種子為原料來測定α-淀粉酶催化效率的實驗,請回答下列與實驗相關的問題。
【實驗目的】測定40°C條件下α-淀粉酶的催化效率。
【實驗材料】萌發(fā)3天的小麥種子。
【主要器材】麥芽糖標準溶液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋、試管等。
【實驗步驟】
(1)制備不同濃度麥芽糖溶液,與斐林試劑生成標準顏色。取7支潔凈試管編號,按下表中所示加入試劑,而后將試管置于60°C水浴中加熱2min,取出后按編號排序。
試劑 | 試管 |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
麥芽糖標準溶液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
蒸餾水(mL) | X | 1.8 | Y | 1.0 | Z | 0.4 | 0 |
斐林試劑(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
| | | | | | | |
表中Z代表的數(shù)值是 。
(2)以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液,將裝有淀粉酶溶液的試管置于 ,取出后迅速冷卻,得到α-淀粉酶溶液。
(3)取A、B、C、D四組試管分別作以下處理:
試管 | A1 | A2 | A3 | B1 | B2 | B3 | C | D |
5%淀粉溶液(mL) | 1 | 1 | 1 | | | | | |
α-淀粉酶溶液(mL) | | | | 1 | 1 | 1 | | 1 |
蒸餾水(mL) | | | | | | | 1 | |
40°C水浴鍋中保溫(min) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
(4)將A1和B1試管中溶液加入到E1試管中,A2和B2溶液加入到E2試管中,A3和B3溶液加入到E3試管中,C、D試管中的溶液均加入到F試管中,立即將E1、E2、E3、F試管在40°C水浴鍋中保溫一段時間。然后分別加入2mL斐林試劑,并經(jīng)過60°C水浴中加熱2min后,觀察顏色變化。
【結果分析】將E1、E2、E3試管中的顏色與 試管進行比較得出麥芽糖溶液濃度,并計算出α-淀粉酶催化效率的平均值。
【討論】①實驗中F試管所起的具體作用是排除 對實驗結果的干擾,從而對結果進行校正。②若要測定β-淀粉酶的活性,則需要對步驟二進行改變,具體的操作是將淀粉酶溶液 ,從而獲得β-淀粉酶。