Question

【題目】據(jù)報(bào)道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標(biāo)，“細(xì)菌門”事件引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請(qǐng)回答下列問題。

（1）某興趣小組欲檢測(cè)某果汁類食品中含有葡萄球菌，請(qǐng)幫他們完善下列步驟。

①配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pH，分裝到錐形瓶后進(jìn)行_____________，在無菌狀態(tài)下加入卵黃液（100mL10%滅菌NaCl溶液中加一個(gè)雞蛋黃，振蕩均勻）搖勻后立即倒平板。

②接種：取待檢測(cè)果汁2.5mL加入22.5mL滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。

實(shí)驗(yàn)組：將接種樣液用________________法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。

對(duì)照組：將______________________用劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為_________對(duì)照。

將上述接種后的培養(yǎng)皿同時(shí)放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)48h。

③觀察：觀察培養(yǎng)基表面_________________________________________

（2）培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖提供___________________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液，所以在配制培養(yǎng)基時(shí)加入高濃度的NaCl溶液可以將它分離出來，此培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。

（3）若要統(tǒng)計(jì)某土壤樣品中該活菌數(shù)目，宜采用________________法，將0.2mL樣品稀釋100倍，用固體培養(yǎng)基對(duì)其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為__________ 個(gè)/mL，該統(tǒng)計(jì)結(jié)果________ (填“低于”或“高于”)實(shí)際值。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 平板劃線 無菌生理鹽水 空白 是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落 碳源和氮源 選擇 稀釋涂布平板法 105 低于

【解析】 (1)①配制培養(yǎng)基時(shí)，分裝之后要進(jìn)行滅菌處理，而對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法。②根據(jù)實(shí)驗(yàn)的單一變量原則，對(duì)照組使用平板劃線法，則實(shí)驗(yàn)組也要采用平板劃線法；空白對(duì)照組不接種，或?qū)?5mL無菌生理鹽水接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。③葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。因此觀察時(shí)，應(yīng)該觀察培養(yǎng)基表面是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落。

(2)牛肉膏和蛋白胨中含有蛋白質(zhì)，故能為葡萄球菌的生長和繁殖提供碳源和氮源；高濃度的NaCl溶液可以把葡萄球菌分離出來，故該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

(3)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)活菌數(shù)目。根據(jù)題意可知，每克土壤中該細(xì)菌的含量為（200+180+220）÷3×（1/0.2）×100=105。因?yàn)?個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí),在平板上只能觀察到一個(gè)菌落，因此該方法統(tǒng)計(jì)結(jié)果低于實(shí)際值。