花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖:
據(jù)圖回答下列問題:
(1)過程①所需的酶是______________________________________________________。
(2)過程②后,在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的________存在,這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標(biāo)志。
(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是________________。原生質(zhì)體經(jīng)過________再生,進而分裂和脫分化形成愈傷組織。
(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和________植株的根尖,通過________、________、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。
(1)纖維素酶和果膠酶
(2)葉綠體
(3)保持原生質(zhì)體完整性? 細胞壁
(4)雙親(或花椰菜和黑芥)? 解離? 漂洗
【解析】(1)過程①是利用纖維素酶和果膠酶去除幼葉細胞和根細胞的細胞壁,制備相應(yīng)原生質(zhì)體;
(2)過程②在PEG的作用下兩個原生質(zhì)體融合在一起,形成雜種細胞,來自幼葉的原生質(zhì)體中有葉綠體存在,可以作為顯微鏡下初步篩選雜種細胞的標(biāo)志;
(3)原生質(zhì)體及剛形成的雜種細胞因為沒有了細胞壁的束縛作用,必須浸泡在適宜濃度且無毒害作用的等滲溶液中,以保持原生質(zhì)體的完整性,原生質(zhì)體經(jīng)過細胞壁的再生后,才能進而分裂和脫分化形成愈傷組織。
(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的分生組織(如根尖),通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片,再在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。
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